アプリケーション：昭光サイエンス

高麗人参には様々な健康効果があることが知られています。高麗人参に含まれるサポニン成分(ジンセノシド）は配糖体の一種です。

今回、修飾ポリスチレン充填カラム（Purif-Pack^Ⓡポリマー）とPurif-Pack^ⓇODSを用いて、高麗人参パウダー中に含まれるサポニン（ジンセノシド）の分取を行いました。

本アプリケーションは、中圧分取（フラッシュクロマトグラフィー）での精製例ですが、中高圧分取装置（Purif^Ⓡ-Rp2）を使用することで、さらに高純度な精製も実現できます。

【一次分離（前処理）】

天然物のサンプルから微量成分を分取するためには、分離を阻害する夾雑物の除去が必須である。

活性物質の探索においては、再現性良く粗分けすることにより効率化が期待できる。

1. 高麗人参パウダー5 gを60% メタノール(50 mL) で抽出し、30分間撹拌した。

2. 抽出液を遠心処理後、上澄を回収し、純水で倍に希釈、分取サンプルとした。

　　ジンセノシドRb1　　　　　　　　パウダー溶解液　　　　　サンプルアプライ　　　　　　　　　 Purif^Ⓡ-Rp2で分取　

一次処理、分取の流れ

Aサンプル溶解（5 g / 50 mL）
60% メタノール水溶液

▼

B水で倍に希釈後
修飾ポリスチレンゲル
(Antares SIZE60)
アプライ（自然落下）

▼

CPurif^Ⓡ-Rp2に接続して
ステップワイズ条件分取
（高感度セルを使用）

▼

図 2 HPLC(+TLC) で　　
サンプルが含まれる
フラクションを同定

▼

図 3 ODS 分取
or
HPLC セミ分取

■分取結果

【分取条件】
装　置：Purif^Ⓡ-Rp2
　　　（中圧、高感度セル）
カラム：Purif-Pack^Ⓡ シリーズ
　　　　Antares SIZE60
移動相：A:水 / B:メタノール
　　　　B: 0%（0‒6 min),
　　　　30% (6‒15 min),
　　　　60% (15‒24 min),
　　　　100% (24‒40 min)
流　量：20 mL/min
検　出：UV203 nm

図1. 修飾ポリスチレンゲルを用いた分取（当社測定値）

■HPLC での確認（図１の各ピークトップ）

【HPLC 分析条件】
カラム：Shodax Asahipak
　　　　NH2P-50 4E
移動相：H₂O/CH₃CN=20/80
流　速：1.0 mL/min
検　出：UV (203 nm)
温　度：40 ℃

図2. HPLC での確認（各ピークトップ）（当社測定値）

※掲載データはカラムの状態や使用条件により変化する場合がございます。

【一次分取で得られた Peak④ の部分を回収し ODS カラムを用いて分取】

ジンセノシドRb1
約8 mgを回収

【分取条件】
装　置：Purif^Ⓡ-Rp2（中圧、高感度セル）
カラム：Purif-Pack^Ⓡ ODS 25μm-SIZE60
移動相：A：アセトニトリル水溶液 30%
　　　　B：メタノール
　　　　B：0%（0-25 min),
　　　　100%（25-36 min：夾雑物確認)
流　量：20 mL/min
検　出：UV203 nm

図 3. ODS カラムの分取 (当社測定値)