ヒアルロン酸のSEC-MALS(濃度依存性)

一般に、水溶性高分子には粘度の高いものが多くサイズ排除モード(SEC)分析では、濃度依存性がでやすいサンプルです。 ここでは、濃度が0.05%と0.10%のヒアルロン酸をSEC-MALS分析し分離挙動を比較してみました。 上の図はMALSで測定した分子サイズ(RMS半径)と溶出容量をプロットしたものでクロマトグラフはRI検出器の信号です。 溶出容量のずれは、0.10%での高分子成分の溶出遅れに起因していると考えられます。 下の図は測定された分子量とRMS半径の関係をプロットしたものですが、ここでは濃度による差異はありません。 0.10%での高分子成分の溶出の遅れは平均分子量、分子サイズの測定値にはほとんど影響しませんので、SEC-MALSを用いると分離挙動の推察が可能となります。

Sample Hyaluronic acid
0.10%(blue), 0.05%(red), 50μL each
Column Shodex OHpak SB-806 HQ x 2
Eluent 100mM NaNO3
Flowrate 1.0ml/min
Detector DAWN DSP + Shodex RI
Result 0.10%: Mw = 1015K, RMS radius = 147.3 nm
0.05%: Mw = 1115K, RMS redius = 149.8 nm

 

 

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